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液基薄层细胞检测离心前处理-Banner.jpg


除间皮细胞外,胸水和腹水还含有淋巴细胞和嗜酸性和嗜中性粒细胞。 蛋白质含量通常在30克/升左右。 细胞内容通常差异很大。 两种液体都可能含有血液,腹水也可能含有脂质。
本文介绍了Hettich离心机应用于胸腔积液或腹水液基细胞学检测样品制备上的实验过程。

Hettich离心机优势:
1. 多种容量可选;2. 高细胞产量;3. 细胞的质量很好;4. 细胞的最佳传播  

制备
1. 样品的制备具有高红细胞含量
由于高红细胞含量要对制剂质量产生负面影响,建议在诱导细胞制剂之前使用裂解缓冲液除去红细胞。
a) 裂解缓冲液的制备
8.29 g 氯化铵(NH4Cl)、1.0 g 碳酸氢钾(KHCO3)和0.037 g 乙二胺四乙 酸(EDTA)用蒸馏水配成1升。
b) 红细胞裂解
● 以350 x g离心样品液10分钟(对应于6位转子中的1700 分-1和4位转子中的1900分-1)
● 吸取上清液并放在一边
● 在裂解缓冲液中重悬沉淀物(1体积份沉积物至10体积份缓冲液)。
● 充分混合并在室温下放置10分钟,血红蛋白以透明红色着色释放。
● 加入10倍体积的生理盐水(0.9%NaCl)或磷酸盐缓冲 盐水以终止反应。

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